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对原核表达的重组建鲤组织蛋白酶L(Cathepsin L,CAT L)蛋白进行尿素洗涤和Ni-NTA亲和层析纯化,该目的蛋白经300 mmol/L咪唑洗脱为单一峰,SDS-PAGE结合TSK-GEL G2000SWxl凝胶过滤高效液相色谱分析表明重组CAT L获得了高度纯化,分子量约28 k D,纯度超过95%。Z-Phe-Arg-MCA底物测活法显示该重组CAT L表现为半胱氨酸蛋白酶活性,能与其内源抑制因子Cystatin以1︰1的摩尔比结合,具有生物学活性。以纯化的重组CAT L蛋白免疫Balb/C小鼠获得抗血清,经ELISA法检测获得的CAT L抗血清效价高于1︰512000;Western blotting鉴定结果表明该抗体具有良好的特异性,能够识别原核表达的重组CAT L蛋白。免疫组织化学分析结果表明,该抗体还能识别建鲤小肠、肝胰脏、脾、背肌和心肌组织表达的内源性CAT L蛋白。因此可利用该抗体从蛋白水平检测CAT L在鱼类不同组织中的表达和分布情况。 相似文献
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Interspecific differences in early life‐history traits in a species complex of stream‐resident galaxiids 下载免费PDF全文
Fish differentially provision resources to eggs and larvae to optimise survival during the critical early life‐history period. Resource allocation is limited by a trade‐off between egg size and fecundity, and the optimal strategy varies with habitat type. This study examines the consequences of egg size differences for the early life‐histories of four closely related galaxiid species which occur in contrasting habitat types on the South Island, New Zealand. Headwater species had substantially larger water‐hardened eggs, longer incubation times, and newly hatched larvae were on average up to 41% longer than lower catchment species. Significant interspecific differences in gape diameter, eye diameter and myomere depth were also observed. Swimming ability was positively associated with larval length at hatch. Interspecific differences in length and swimming ability were generally maintained throughout the larval period, despite larvae being reared under relatively benign conditions where many other studies suggest initial differences should disappear. These results demonstrate the consequences of differential maternal provisioning to the egg for larval traits. The larger larvae of headwater species are likely to be more resistant to starvation and have improved foraging ability compared to lower catchment species; traits which are likely to confer them survival advantages in the low productivity, food‐scarce environments they occupy. The smaller larvae of lower catchment species are likely to be a consequence of females investing in fecundity in these relatively resource‐rich streams. 相似文献
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设计了用于洁蛋保鲜高效自动涂膜的洁蛋覆膜机,开发了控制系统,通过试验对设备的性能进行了验证.对电动机频率分别为5、10、15、20、25、30 Hz下的进蛋链条线速度和设备的处理量进行性能测试,验证了装置的实际生产能力.蛋壳表面干燥情况与覆膜状况的试验结果表明,在温度为25℃,相对湿度为60%,喷雾压力为0.6 MPa,单位时间喷雾量为43.6 mL/min,烘干机干燥能力为1.71 kJ/s时,最佳进蛋链条线速度为12.01 mm/s,处理量为4804颗/h,烘干机长度为50 cm,洁蛋干燥时间为4.16s. 相似文献
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采用单克隆抗体制备技术,建立了分泌抗猪瘟病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株,液氮保存4年后复苏,细胞在HAT选择培养基中生长旺盛,分泌抗体稳定,分别命名为YNF1,YNF2,YNF3,YNF4,杂交瘤细胞染色体数介于96~115条。细胞培养上清和腹水的单抗间接ELISA效价分别为1∶80~1∶160和1∶5 000~1∶10 000。在间接ELISA和夹心ELISA检测中单抗与猪瘟病毒呈特异性反应,与正常的猪、兔肾组织提取液及其血清Ig无交叉。抗体蛋白属IgG类,亚类及轻链分别为IgG1/λ,IgG2a/κ,IgG2a/λ,IgG1/λ。结果表明,4株杂交瘤是分泌抗猪瘟病毒单克隆抗体的细胞株,可长期传代无限分泌单抗,是进一步研究猪瘟病毒和开发敏感、特异、快速诊断猪瘟试剂盒和试纸探针的免疫学特异性试剂来源。 相似文献
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溶菌酶是一种无毒、无害、安全性较高的高盐基水解蛋白酶,在食品和医药领域有着广泛的用途。试验以蛋清为原料,通过阳离子交换树脂法提取高活力(纯度)溶菌酶。试验确定吸附与洗脱条件,蛋清与树脂的体积比为5∶1,搅拌时间为3.5h,洗脱液的离子强度为1mol/L,pH值为8.0,洗脱液经等电点沉淀和透析进一步分离纯化,所得浓缩液以110℃的进风温度和70℃的出风温度进行喷雾干燥得溶菌酶,产品活力为20650U/mg,水分含量为6.2%。 相似文献
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